产品货号:
HR8106
中文名称:
RIPA裂解液(不含triton X-100)
英文名称:
产品规格:
100ml
发货周期:
1~3天
产品价格:
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RIPA裂解液采用优质原料配制,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用,是经典常用的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等下游实验。根据相应实验要求添加自己需要的蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂。
组分 | 规格 |
RIPA裂解液(不含triton X-100) | 100mL |
说明书 | 1份 |
保存:2~8℃,有效期1年。
25mM Tris·HCl,150mM NaCl,1% NP-40,1%脱氧胆酸钠,0.1% SDS。
- 细胞裂解
- 取5~10×106个细胞,在4℃,1000rpm条件离心5~10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
- 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
- 每5×106个细胞中加入500μL冷的裂解液(每106个细胞,大约10mg或10μL压积,加100μL RIPA裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100μL~150μL,或一个75cm2培养瓶加1mL。裂解液和细胞应充分接触。如果RIPA裂解液不足量,细胞裂解效率将会降低),混匀后,在4℃条件下振荡15~20分钟。
- 在4℃,14000rpm条件下离心15分钟。
- 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
- 取5~10×106个细胞,在4℃,1000rpm条件离心5~10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
- 组织裂解
- 取100mg组织样本剪碎,加入1mL裂解液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
- 将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中,在4℃,10000rpm条件下离心5分钟。
- 将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。
- 取100mg组织样本剪碎,加入1mL裂解液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
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